PULLULANASE/ LIMIT-DEXTRINASE ASSAY KIT (PullG6 Method)

HÃNG SẢN XUẤT: MEGAZYME – IRELAND

CODE: K-PullG6

Bộ kit test PullG6 để đo pullulanase sử dụng một chất nền được xác định hòa tan trong nước, cụ thể là 4,6-O-benzylidene-4-nitrophenyl-63-α-D-maltotriosyl-maltotriose (BPNPG3G3), kết hợp với các enzyme phụ trợ α-glucosidase và β-glucosidase. Khi thủy phân chất nền tại liên kết 1,6-α bằng pullulanase hoặc limit-dextrinase, 4-nitrophenyl-β-maltotrioside được giải phóng ngay lập tức được thủy phân thành glucose và 4-nitrophenol nhờ tác động phối hợp của các enzyme α-glucosidase và β-glucosidase trong hỗn hợp thuốc thử. Phản ứng kết thúc và các ion phenolate được tạo ra bằng cách thêm kiềm loãng. Độ hấp thụ được đọc ở 400 nm và giá trị thu được tương quan trực tiếp với hoạt động pullulanase.

Nguyên tắc phản ứng:

• Số lượng (Kit size):       100 / 200 assays per kit

• Phương pháp (method): Quang phổ (Spectrophotometry)

• Phân tích (Analyte): Pullulanase/Limit-Dextrinase

•  Thiết bị cần thiết (Assay Format): Spectrophotometer

•  Thời gian phản ứng (reaction time): ~ 10 min (Pullanase), ~ 30 min (Limit-Dextrinase)

• Giới hạn phát hiện (Limit of Detection): 0.18 U/mL for pullulanase preparations (50-fold dilution); 0.01 U/g for limit dextrinase in milled malt

• Mẫu ứng dụng (application example): Thử nghiệm chế phẩm pullulanase của vi khuẩn. Đo dextrinase giới hạn trong chiết xuất mạch nha.

•  Phương pháp chứng nhận (method recognition): Novel method

Ưu điểm:

- Độ nhạy cao

- Thích hợp cho các định dạng phân tích thủ công và tự động

- Không có sự can thiệp của quá trình chuyển hóa glycosyl

- Rất tiết kiệm chi phí

- Tất cả các thuốc thử đều ổn định trong > 1 năm sau khi chuẩn bị

- Rất cụ thể

- Định dạng đơn giản